Selon un article publié dans GEN, les développeurs de produits biologiques n’ont peut-être pas besoin d’achever le clonage unicellulaire avant de produire du matériel pour chaque première étude chez l’humain. Pour les programmes qui s’y prêtent, la fabrication à partir d’un pool cellulaire stable caractérisé pourrait sortir le développement de la lignée cellulaire du chemin critique, tandis que les chercheurs évaluent un candidat dans une première étude clinique.
Un pool stable est une population de cellules dont le génome intègre un construit d’expression. Contrairement aux systèmes d’expression transitoire, il permet une expression stable, mais les cellules ne sont pas identiques. L’intégration aléatoire classique peut entraîner des différences dans le nombre de copies du gène et dans le site d’intégration, susceptibles d’influer sur la croissance cellulaire, la productivité, la stabilité et la qualité du produit. Le clonage permet de remédier à cette variabilité en identifiant une cellule individuelle présentant les propriétés souhaitées ; certains systèmes basés sur des transposases visent à réduire la variabilité plus tôt, afin d’obtenir un pool plus prévisible sans le rendre clonal.
Utiliser un tel pool pour la fabrication clinique ne signifie pas reporter les contrôles qualité. L’article indique que les développeurs doivent toujours évaluer l’identité et la pureté des cellules, ainsi que la présence d’agents adventices, fixer des limites au nombre de doublements de population et établir que la population reste adaptée tout au long de la fabrication. La protéine obtenue doit également faire l’objet d’une évaluation propre à la molécule portant sur son identité, sa pureté, sa puissance et ses autres attributs de qualité pertinents.
L’article évoque des expériences publiées dans lesquelles des pools stables générés par transposon ont été utilisés pour une fabrication conforme aux BPF, les procédés ultérieurs dérivés de clones présentant des performances et des profils de qualité produit comparables. Des mesures telles que la concentration en cellules viables, la viabilité, le titre en anticorps et la productivité spécifique des cellules ont évolué de façon similaire, tout comme la pureté, les variants de charge et la glycosylation. L’article précise que les matériaux issus d’un pool et ceux issus d’un clone ne seront pas nécessairement identiques pour toutes les mesures, et que les résultats antérieurs ne remplacent pas l’évaluation de chaque molécule.
Cette stratégie peut également permettre d’adapter plus étroitement l’échelle de production aux besoins d’une étude clinique précoce. Un exemple présenté est la plateforme GMP SmartScale de GBI Biomanufacturing, qui associe le développement d’un pool stable à un procédé amont fondé sur des flacons agités, de la culture d’ensemencement jusqu’à une échelle de production de 7 litres, puis à la purification, à la fabrication de la substance médicamenteuse et au remplissage-finition. Le principe général consiste à utiliser le plus petit procédé GMP robuste capable de fournir le matériel requis, tout en prévoyant un passage à des procédés de plus grande échelle si la demande augmente.
Dans cette approche, le clonage unicellulaire peut se poursuivre en parallèle du développement précoce ou commencer après que les résultats cliniques ont justifié des investissements supplémentaires. Si le programme avance, un clone dérivé peut être sélectionné et mis en banque, la comparabilité entre les matériaux issus du pool et ceux issus du clone constituant une tâche de développement définie.
L’article indique qu’une approche privilégiant d’abord le clone peut rester préférable pour les molécules présentant des profils de qualité produit difficiles, une expression instable, des considérations de sécurité inhabituelles ou des besoins importants en matériel dès le départ. La fabrication à partir d’un pool stable est présentée comme une solution de remplacement pour les candidats appropriés, et non comme un substitut au développement classique de lignées cellulaires.